技术文章
Technical articles二氧化碳培养箱广泛应用于医学、**学、遗传学、微生物、农业科学、**学的研究和生产,已经成为上述领域实验室*普遍使用的常规仪器之一,其通过在培养箱箱体内模拟形成一个类似细胞/组织在生物体内的生长环境如恒定的酸碱度(pH值: 7.2~7.4) 、稳定的温度(37C)、较高的相对湿度(95%)、稳定的C02水平(5%) ,来对细胞/组织进行体外培养的一种装置。二氧化碳培养箱的选购。
全**的用户对二氧化碳培养箱都有两条*基本的要求,一是要求二氧化碳培养箱能够对温度、二氧化碳浓度和湿度提供***稳定的控制,以便于其研究工作的进展;二是要求二氧化碳培养箱能够对培养箱内的微生物污染进行有效的防范,并且能够定期消除污染,以保护研究成果,防止样品损失。所以,选购二氧化碳培养箱的老师*关心的当然就是其高可靠性、对污染的防范和控制及使用方便。
一、温度控制
1.加热方式:
气套式加热和水套式加热,两种加热系统都是**和可靠的,同时它们都有着各自的*点和缺点。水套式加热是通过--个*立的水套层包围内部的箱体来维持温度恒定的,其*点:水是--种很好的*热物质,当遇到断电的时候,水套式系统就可以比较长时间的保持培养箱内的温度**性和稳定性(维持温度恒定的时间是气套式系统的3~4倍),有利于实验环境不太稳定(如有用电限制,或者经常停电)并需要保持长时间稳定的培养条件的用户选用。气套式加热是通过遍布箱体气套层内的加热器直接对内箱体进行加热的,又叫六面直接加热。气套式与水套式相比,具有加热快,温度的恢复比水套式培养箱迅速的特点,特别有利于短期培养以及需要箱门频繁开关的培养。此外,对于使用者来说气套式设计比水套式更简单化( 水套式需要对水箱进行加水、清空和清洗,并要经常监控水箱运作的情况)。
2.温控系统:
保持培养箱内恒定的温度是维持细胞健康生长的重要因素,因此**可靠的温控系统是培养箱*的重要部分。为了使培养箱更加稳定的工作,我们推荐用户选用具备相互*立三重温度控制功能的二氧化碳培养箱,即箱内温度控制、超温报警控制和环境温度监控。
我们知道培养箱的*低工作温度一般是高于室温5C, 如果没有缓慢加热模式就非常容易在夏天高温天气(如室温30C左右时)产生箱内温度过高;HF90的*立超温报警功能能够快速**的在培养箱内温度高于培养温度1C时,切断培养箱的主加热系统,同时声光报警;HF90的环境温度监控可以根据环境温度的变化自动调节培养箱外门辅助加热系统的功率,达到**控制箱体内温度的目的。
3.温度均一性:
二氧化碳培养箱箱体内的温度均一性也是用户需要考虑的主要因素,-般在箱体内配备了风扇以及风道的培养箱的均一度要好很多,同时此装置还有助于箱内温度、C02浓度和相对湿度的迅速恢复。
当然,风扇/风道的*化也是同等重要的,HF90二氧化碳培养箱*特设计的大直径风扇和循环风道能郇够*箱体内温度和二氧化碳浓度的均一性。大直径风扇相比其他*培养箱的风扇,能够在低转速( 低风速)时产生大的空气循环流量,在达到均一性目的的同时,降低风速、减少箱内震动。降低风速、减少震动同时也就大大提高了箱内细胞培养的成功率。
二、二氧化碳浓度控制
1.两种控制系统:
红外传感器(IR) 或热导传感器(TCD) 进行测量。两种传感器都是**的,但都各有*缺点。热导传感器监控C02浓度的工作原理是基于对内腔空气热导率的连续测量,输入co2气体的低热导率会使腔内空气的热导率发生变化,这样就会产生一个与C02浓度直接成正比的电信号。红外传感器(IR) 它是通过一个光学传感器来检测C02水平的。IR系统包括一个红外发射器和一一个传感器,当箱体内的C02吸收了发射器发射的部分红外线之后,传感器就可以检测出红外线的减少量,而被吸收红外线的量正好对应于箱体内C02的水平,从而可以得出箱体内C02的浓度。由于IR系统是通过红外线减少来确定箱内C02浓度,而箱体内颗粒物能够反射或部分吸收红外线,使得IR系统对箱体内颗粒物的多少比较敏感,因此IR传感器应用在含HEPA高效空气过滤器的培养箱内比较合适。
2. C02测量系统自动校准功能:
无论哪种C02测量系统在使用一段时间后都会产生漂移,而产生漂移后直接会导致箱体内二氧化碳浓度不能稳定在我们的设定值,致使培养失败,所以我们在这里强烈建议用户在选购培养箱时必须要选择带有CO2测量系统自动校准功能的培养箱。
3. C02浓度均一性:此点与温度均一性的要求类似,在此就不做赘述。
三、相对湿度
箱内湿度对于培养工作来说是一项非常重要然而又经常被忽略的因素。维持足够的湿度水平并且要有足够快的湿度恢复速度(如在开关门后)才能**不会由于过度干燥而导致培养失败。目前大多数的二氧化碳培养箱是通过增湿盘的蒸发作用产生湿气的(其产生的相对湿度水平可达95%左右,但开门后湿度恢复速度很慢)。我们在此建议用户在选购二氧化碳培养箱的时候尽量选择湿度蒸发面积大的培养箱,因为我们知道湿度蒸发面积越大,越容易达到*大相对饱和湿度大相对饱和湿度并且开关门后的湿度恢复的时间越短。
四、防污染设计和****系统
污染是导致细胞培养失败的一一个主要因素,因而,二氧化碳培养箱的制造商们设计了多种不同的装置去减少和防止污染的发生,其主要途径都是尽量减少微生物可以生长的区域和表面,并结合自动排除污染装置来有效防止污染的产生。例如,鉴于C02培养箱在使用过程中有时会伴有霉菌生长,为确保培养箱免受污染并且**仪器箱体内的生物清洁性,相继问世了多种****方式,如带有紫外**功能的C02培养箱;还有的设计生产了HEPA过滤器能过滤培养箱内空气,可过滤除去99. 97%的0. 3微米以上的颗粒;此外,还开发设计了能使箱内达到高温湿热的环境从而杀死污染微生物,达到**** 目的的培养箱。这些装置对于细胞培养来说是*,但选择何种清洁装置呢?首先,我们考虑的当然是各种方式的**能力,紫外**能力是与紫外灯距离目标的距离的二次方成反比,距离越远,**能力越差,所以紫外**方式有其局限性,难以达到***的要求; HEPA过滤器由于受到过滤膜孔径的影响,无法去除病毒和一些微小**,也有其局限性;相比较而言,高温**是目前比较有效***的方法,高温**又分为两类,-是传统的高温干热**,另-种是**的高温湿热**。
接下来我们重点说一下高温干热和高温湿热两种方法的优劣。高温湿热由于蒸汽潜热大,穿透力强,容易使蛋白质变性或凝固,因此该法的**效率比干热**法高。
其原因有三:
①蛋白质凝固所需的温度与其含水量有关,含水量愈大,发生凝固所需的温度愈低。湿热**的菌体蛋白质吸收水分,所以较同一温度的干热空气中易于凝固。
②湿热**过程中蒸汽放出大量潜热,加速提高湿度。因而湿热**比干热所需温度低,如在同一温度下,则湿热**所需时间比干热短。
③湿热的穿透力比干热大,使其深部也能达到**温度,故湿热比干热收效好一些。
所以高温**并不是简单的看**温度,主要是看是否湿热**.另外,从使用角度看,湿热**-般控制在90C就能达到很*的**效果,整个**过程中培养箱内的**附件都不用取出,可以全部进行**;而干热**为了达到较好的效果,温度-般都在100C以 上,在这种温度下**培养箱内的传感器、HEPA过滤器等都要在**过程中取出,等**结束再装上,这样即麻烦,附件又不能同时**,而且增加二次污染的几率,再者要达到100C以上的高温,培养箱的加热系统的电热丝必然要加粗,这会导致培养箱的温度控制难度增加,均--性变差。所以我们建议用户在选购二氧化碳培养箱时选择含高温湿热**方式的培养箱。
五、其它因素
二氧化碳培养箱的容积也是-一个不可忽略的因素,买小了不够用,大了又浪费又占地方。二氧化碳培养箱的可选容积非常广,而且每种类型又有不同的容积可选。此时,就需要您在选购前对所需培养箱容积的范围有-一个比较**的了解,并在此基础上多预留一点空间,以备不时之需。
此外,每一个使用者都希望所用的仪器能够方便好用,微处理控制系统和其它各种功能附件(如高温自动调节和警报装置、C02警报装置、密码保护设置、自动校准系统、LCD显示系统等等)的运用,就使得二氧化碳培养箱的操作和控制都非常的简便。不同的微处理系统虽然名字不相同,但是其原理与控制效果则无甚区别,选购时不必太在意它们名字上的区别,关键是要自己觉得使用起来方便,容易操作。